Влияние комплексов Сперотон и Синергинна показатели окислительного стресса эякулята у пациентов, готовящихся к программам вспомогательных репродуктивных технологий
Опубликовано в журнале:
« Эффективная фармакотерапия. Урология и нефрология», №1, 2019
Представлены результаты исследования, в ходе которого установлено достоверное положительное влияние комплексов Сперотон и Синергин на функциональное состояние репродуктивной системы у мужчин с патозооспермией, готовящихся к участию в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Так, прием комплексов Сперотон и Синергин в течение трех месяцев способствовал увеличению доли сперматозоидов с поступательным движением (А + В) и морфологически нормальных сперматозоидов в эякуляте, значимому уменьшению уровней активных форм кислорода и фрагментации ДНК сперматозоидов.
Ключевые слова: мужское бесплодие, окислительный стресс эякулята, вспомогательные репродуктивные технологии, Сперотон, Синергин
Effect of Speroton and Sinergin Complexes on Indicators of Oxidative Stress of Ejaculate in Patients Preparing for Programs of Assisted Reproductive Technologies
Provide the results of a study proved statistically significant positive effect of Speroton and Sinergin supplements on the functional state of the reproductive system in men with pathozoospermia preparing for the program of assisted reproductive technologies. Thus, the use of Speroton and Sinergin complexes for three months contributed to an increase in the proportion of sperm with forward motion (A + B) and the number of morphologically normal sperm in the ejaculate, as well as the significant reduction in the levels of reactive oxygen forms and DNA fragmentation of sperm.
Key words: male infertility, oxidative stress of ejaculate, assisted reproductive technologies, Speroton, Sinergin
По статистическим данным, от 15 до 25% пар испытывают проблемы с зачатием и вынуждены обращаться за медицинской помощью [1, 2], причем не всегда можно обнаружить, что привело к снижению фертильности [3]. Одной из распространенных причин мужского бесплодия является гиперпродукция активных форм кислорода (АФК) [4]. Так, у 25-30% бесплодных мужчин повышен уровень АФК в сперме. С одной стороны, АФК в физиологических концентрациях необходимы для гиперактивации и конденсации сперматозоидов и акросомной реакции. С другой, чрезмерное производство АФК незрелыми зародышевыми клетками и лейкоцитами индуцирует дисфункцию сперматозоидов, приводит к повреждению ДНК сперматозоидов, вызывает перекисное окисление липидов [5]. Оно в свою очередь, способствуя быстрой потере внутриклеточного аденозинтрифосфата, вызывает повреждение, снижение жизнеспособности и нарушение морфологии сперматозоидов [6, 7]. Сперматозоиды самостоятельно не могут устранить повреждение, вызванное АФК, поскольку у них отсутствуют необходимые системы восстановления цитоплазматического фермента. Кроме того, клеточные мембраны сперматозоидов богаты полиненасыщен ными жирными кислотами, легко подвергающимися перекисному окислению. Все это делает сперматозоиды восприимчивыми к кислородному повреждению и, следовательно, перекисному окислению липидов [8].
У здоровых мужчин ДНК спермы защищена от окислительного стресса двумя основными механизмами. Во-первых, ДНК плотно свернута и упакована в хроматин, так что воздействие АФК на генетический материал минимально [9]. Во-вторых, естественные антиоксиданты в семенной плазме и сперматозоидах помогают нормализовать уровень продукции АФК: они останавливают окислительную цепную реакцию [5], устраняют, поглощают АФК или уменьшают их образование [6]. Некоторые природные антиоксиданты являются ферментами, например каталаза и супероксиддисмутаза, а также неферментативными соединениями, в частности витамины C и E, карнитины. Эти антиоксиданты нейтрализуют АФК, предотвращая развитие окислительного стресса и сохраняя функции сперматозоидов [10]. К эндогенным антиоксидантам относятся также лактоферрин и коэнзим Q [5]. Таким образом, сперматозоиды с помощью антиоксидантных механизмов инактивируют избыточное количество АФК, тем самым защищая гонадные клетки и зрелые сперматозоиды от окислительного повреждения [11].
Однако если в здоровом организме соотношение прооксидантов и антиоксидантов сбалансировано, то в патологических условиях неконтролируемое производство АФК превышает антиоксидантную способность семенной плазмы, что приводит к окислительному стрессу [1, 11]. Другими словами, окислительный стресс представляет собой дисбаланс между продуцированием АФК и способностью биологической системы обезвреживать реактивные промежуточные соединения или останавливать возникший апоптоз [3, 4]. Ввиду того что окислительный стресс нарушает оплодотворяющую способность, ведет к нарушениям эмбрионального развития, потере беременности и врожденным дефектам плода, он является предметом пристального изучения клиницистов и ученых 14.
Таким образом, у некоторых пациентов, страдающих бесплодием, может быть либо перепроизводство АФК, либо недопроизводство антиоксидантов. В этой связи для восстановления баланса между оксидантной и антиоксидантной системами в семявыносящих путях им необходимо потреблять достаточное количество экзогенных антиоксидантов. Проводились исследования для выяснения эффективности различных антиоксидантов. Однако результаты были неубедительными, поскольку большинство экспериментов имели небольшой размер выборки, отличались дозировкой действующих веществ и продолжительностью терапии, в них отсутствовали группы контроля [19].
Цель исследования
Изучить влияние комплексов Сперотон и Синергин на изменение показателей окислительного стресса эякулята и индекс фертильности пациентов, планирующих участие в программах ВРТ.
Материал и методы
В исследование включены 60 ин фертильных мужчин в возрасте от 26 до 45 лет (средний возраст 34 ± 3,2 года) с различными идиопатическими нарушениями спер мограммы, которые с партнершами планировали вступление в программы ВРТ.
Статистические тесты планировалось проводить как двухсторонние с уровнем а = 5%. Для описания количественных переменных использовались следующие характеристики: количество пациентов, среднее значение, стандартное отклонение, стандартная ошибка, медиана, экстремальные значения. Статистическая достоверность изменений количественных переменных оценивалась с применением парного t-теста Стьюдента или знакового критерия Вилкоксона.
Результаты
Сравнение основных показателей спермограммы исходно и через три месяца выявило достоверное (р Литература
Влияние комплексов Сперотон и Синергин на показатели окислительного стресса эякулята у пациентов, готовящихся к программам вспомогательных репродуктивных технологий
Представлены результаты исследования, в ходе которого установлено достоверное положительное влияние комплексов Сперотон и Синергин на функциональное состояние репродуктивной системы у мужчин с патозооспермией, готовящихся к участию в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Так, прием комплексов Сперотон и Синергин в течение трех месяцев способствовал увеличению доли сперматозоидов с поступательным движением (А + В) и морфологически нормальных сперматозоидов в эякуляте, значимому уменьшению уровней активных форм кислорода и фрагментации ДНК сперматозоидов.
Представлены результаты исследования, в ходе которого установлено достоверное положительное влияние комплексов Сперотон и Синергин на функциональное состояние репродуктивной системы у мужчин с патозооспермией, готовящихся к участию в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Так, прием комплексов Сперотон и Синергин в течение трех месяцев способствовал увеличению доли сперматозоидов с поступательным движением (А + В) и морфологически нормальных сперматозоидов в эякуляте, значимому уменьшению уровней активных форм кислорода и фрагментации ДНК сперматозоидов.
По статистическим данным, от 15 до 25% пар испытывают проблемы с зачатием и вынуждены обращаться за медицинской помощью [1, 2], причем не всегда можно обнаружить, что привело к снижению фертильности [3].
Одной из распространенных причин мужского бесплодия является гиперпродукция активных форм кислорода (АФК) [4]. Так, у 25–30% бесплодных мужчин повышен уровень АФК в сперме. С одной стороны, АФК в физиологических концентрациях необходимы для гиперактивации и конденсации сперматозоидов и акросомной реакции. С другой, чрезмерное производство АФК незрелыми зародышевыми клетками и лейкоцитами индуцирует дисфункцию сперматозоидов, приводит к повреждению ДНК сперматозоидов, вызывает перекисное окисление липидов [5]. Оно в свою очередь, способствуя быстрой потере внутриклеточного аденозинтрифосфата, вызывает повреждение, снижение жизнеспособности и нарушение морфологии сперматозоидов [6, 7].
Сперматозоиды самостоятельно не могут устранить повреждение, вызванное АФК, поскольку у них отсутствуют необходимые системы восстановления цитоплазматического фермента. Кроме того, клеточные мембраны сперматозоидов богаты полиненасыщенными жирными кислотами, легко подвергающимися перекисному окислению. Все это делает сперматозоиды восприимчивыми к кислородному повреждению и, следовательно, перекисному окислению липидов [8].
У здоровых мужчин ДНК спермы защищена от окислительного стресса двумя основными механизмами. Во-первых, ДНК плотно свернута и упакована в хроматин, так что воздействие АФК на генетический материал минимально [9]. Во-вторых, естественные антиоксиданты в семенной плазме и сперматозоидах помогают нормализовать уровень продукции АФК: они останавливают окислительную цепную реакцию [5], устраняют, поглощают АФК или уменьшают их образование [6]. Некоторые природные антиоксиданты являются ферментами, например каталаза и супероксиддисмутаза, а также неферментативными соединениями, в частности витамины C и E, карнитины. Эти антиоксиданты нейтрализуют АФК, предотвращая развитие окислительного стресса и сохраняя функции сперматозоидов [10]. К эндогенным антиоксидантам относятся также лактоферрин и коэнзим Q10 [5]. Таким образом, сперматозоиды с помощью антиоксидантных механизмов инактивируют избыточное количество АФК, тем самым защищая гонадные клетки и зрелые сперматозоиды от окислительного повреждения [11].
Однако если в здоровом организме соотношение прооксидантов и антиоксидантов сбалансировано, то в патологических условиях неконтролируемое производство АФК превышает антиоксидантную способность семенной плазмы, что приводит к окислительному стрессу [1, 11]. Другими словами, окислительный стресс представляет собой дисбаланс между продуцированием АФК и способностью биологической системы обезвреживать реактивные промежуточные соединения или останавливать возникший апоптоз [3, 4]. Ввиду того что окислительный стресс нарушает оплодотворяющую способность, ведет к нарушениям эмбрионального развития, потере беременности и врожденным дефектам плода, он является предметом пристального изучения клиницистов и ученых [12–15].
Внедрение в клиническую практику программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) позволило реализовать репродуктивную функцию при различных заболеваниях как у женщин, так и у мужчин в случаях, которые ранее считались абсолютно бесперспективными [2, 16]. Однако при высоком уровне АФК программы ВРТ не имеют преимуществ перед зачатием естественным путем. Часто сам процесс центрифугирования сперматозоидов в программах ВРТ увеличивает продукцию АФК и вызывает окислительный стресс. A. Agarwal и соавт. установили, что сперматозоиды производили значительно больше АФК, когда подвергались повторным циклам центрифугирования [17]. При этом длительность центрифугирования оказалась важнее, чем его сила, поскольку способствовала большей фрагментации ДНК с неблагоприятными последствиями для ВРТ. Повреждение ДНК – повод для беспокойства, поскольку в программах ВРТ, в частности во время интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов, сперматозоиды со значительным количеством повреждений ДНК могут оплодотворить ооцит с последующими негативными исходами [18].
Таким образом, у некоторых пациентов, страдающих бесплодием, может быть либо перепроизводство АФК, либо недопроизводство антиоксидантов. В этой связи для восстановления баланса между оксидантной и антиоксидантной системами в семявыносящих путях им необходимо потреблять достаточное количество экзогенных антиоксидантов. Проводились исследования для выяснения эффективности различных антиоксидантов. Однако результаты были неубедительными, поскольку большинство экспериментов имели небольшой размер выборки, отличались дозировкой действующих веществ и продолжительностью терапии, в них отсутствовали группы контроля [19].
Изучить влияние комплексов Сперотон и Синергин на изменение показателей окислительного стресса эякулята и индекс фертильности пациентов, планирующих участие в программах ВРТ.
В исследование включены 60 инфертильных мужчин в возрасте от 26 до 45 лет (средний возраст 34 ± 3,2 года) с различными идиопатическими нарушениями спермограммы, которые с партнершами планировали вступление в программы ВРТ.
Как улучшить спермограмму
Прежде чем обсуждать вопрос улучшения спермограммы, нужно обсудить два коротких, но важных момента.
Именно поэтому у проблемы мужской фертильности нет какого-то специфического лечения, нет таблетки от бесплодия, как, например, есть таблетки от давления. Каждый раз мы подбираем индивидуальное лечение. Иногда для коррекции, например, приходится использовать препараты, применяющиеся в других областях медицины — в офтальмологии или кардиологии, если механизмы их действия могут использоваться для решения проблем с фертильностью.
Факторы, оказывающие самое негативное воздействие на мужское репродуктивное здоровье
Курение
Курение — один из самых сильных врагов сперматогенеза. Множественные стрессы, которые вызывают сигареты в нашем организме, в первую очередь оказывают неблагоприятное влияние именно на фертильность. Поэтому в процессе подготовки пациента к сдаче биоматериала, например, для программ вспомогательных репродуктивных технологий, как правило, ему ограничивают или полностью запрещают курение по крайней мере 3–5 дней перед сдачей биоматериала.
Алкоголь
Что касается алкоголя, здесь ситуация менее критическая, и многие наверняка обращали внимание, что в неблагополучных семьях, где взрослые употребляют алкоголь в больших количествах, дети все равно, как правило, рождаются.
Излучение
И еще один важный фактор — это активное излучение. Конечно, никто из нас не ночует в ядерном реакторе. Но не стоит забывать, что мобильные телефоны или мониторы компьютеров — это тоже источники излучения, которые фактически выбивают фрагменты из нашей ДНК, вызывая разрывы ДНК-цепочек и понижая фертильную способность сперматозоидов к выполнению своей биологической миссии.
Методы и препараты для улучшения спермограммы
Как я уже говорил, специфического лечения для улучшения качества спермограммы практически не существует. Поэтому мы назначаем витамины, ферменты, микронутриенты, антиоксиданты и другие препараты, которые дают организму необходимый набор веществ, а он сам уже разбирается, что ему конкретно не хватает.
Антиоксиданты
Оксидативный стресс — это основная проблема XXI века, связанная с проживанием в условиях городов, использованием в повседневной жизни источников активного излучения. Против всего этого и используются препараты, которые уменьшают окислительный стресс, — антиоксиданты.
Ферменты
Могут использоваться ферменты, так как при нарушении спермограммы достаточно часто встречается изменение вязкости спермоплазмы, и, соответственно, нужны препараты, которые улучшают реологию биологической жидкости.
Средства для улучшения метаболизма
Используются средства для улучшения метаболизма, такие как рибоксин. Несмотря на то что сперматогенез существует практически в течение всей жизни мужчины, сперматозоиды после 45 лет становятся менее пригодны для обеспечения своей биологической миссии, поскольку в течение жизни накапливаются генетические поломки. Соответственно, эффективность, например, такой процедуры, как инсеминация, у мужчин старше 45 лет не превышает 5%, поэтому у мужчин в возрасте такой метод практически не используется.
Эмоксипин
Могут использоваться препараты, применяющиеся в офтальмологии. Например, когда у пациента идёт отслойка сетчатки, то ее либо приваривают лазером, либо пришивают и под неё вводится препарат эмоксипин. Дело в том, что он достаточно прилично снижает концентрацию антиспермальных антител, то есть уменьшает выраженность иммунного фактора.
Биологически активные добавки
Иногда приходится использовать биологически активные добавки, поскольку они в своем составе могут содержать все перечисленные вещества в удобной форме и дозировке, то есть в одной капсуле может содержаться сразу все необходимое для улучшения мужской фертильности. Поэтому основное преимущество БАДов — это просто эргономика, то есть удобство приема.
Физические нагрузки
В обязательном порядке мы рекомендуем дозированные физические нагрузки. С возрастом, примерно с 30 лет, у нас в организме начинает потихоньку уменьшаться количество андрогенов, то есть мужских половых гормонов, развиваются возрастные заболевания, появляется избыток жировой ткани, особенно на передней брюшной стенке. А физическая активность, добавочные прогулки повышают уровень андрогенов и могут улучшить показатели спермограммы.
Вопросы и ответы об улучшении спермограммы
Можно. Большинство лабораторий, которые занимаются сперматологией, обычно рекомендуют сдавать материал с 3-го по 5-й день воздержания после соответствующей подготовки. В этом есть определенный смысл, потому что одна из фракций сперматозоидов, так называемая активная фракция, в это период — с 3-го по 5-й день — оказывается на своем пике. Начиная с 5-го дня она начинает уходить в нули где-то к 6–10 суткам. И дальнейший прирост сперматозоидов в эякуляте идет за счет накопления аномальных сперматозоидов.
Для того чтобы подготовиться, необходимо исключить следующие вещи: курение, желательно алкоголь, кофе, специи, термические нагрузки (ванна, баня, сауна). Все эти факторы ухудшают кровоснабжение тазовых органов, поэтому при подготовке их надо учитывать.
Действительно, сперматогенез так быстро не восстанавливается. Полное время развития сперматозоида составляет 72 дня. Поэтому при отмене сигарет первичные улучшения можно наблюдать не раньше чем через три месяца. Другое дело, что каждая сигарета оказывает на организм общее негативное воздействие, то есть влияет не только на сперматогенез, но и на процессы газообмена в легких, кровоснабжения тазовых органов. Поэтому устранение этого фактора может в некоторой степени улучшить качество сперматогенеза — не за счет качественного состава, а за счет общих характеристик, в том числе в плане реологии, которые тоже нужно учитывать.
«Бруди» — препарат достаточно интересный. Дело в том, что в его составе содержится омега-3, то есть рыбий жир, в большой концентрации. Омега-3 — это универсальный строительный материал для любых биологических клеток, в том числе и для сперматозоидов. Кроме того, в состав «Бруди» входят активные полинасыщенные жирные кислоты в больших концентрациях, которые также активно расходуются организмом при построении новых клеток, в частности для сперматогенеза, процесс которого идет постоянно. И чем больше образуется новых сперматозоидов, тем больше для них требуется дополнительного строительного материала, даже несмотря на высокий процент брака (а 85% брака при формировании сперматозоидов является нормой).
В «Спермактине» содержатся фитоэнергетики, нутриенты и антиоксиданты, то есть по крайней мере половина тех веществ, которые нужны для формирования полноценного сперматогенеза.
Поэтому и у «Бруди», и у «Спермактина» есть определенная эффективность, которая клинически доказана. Но часто бывает, что к ним дополнительно приходится добавлять другие препараты.
Тератозооспермия — неприятный симптом. Я уже говорил, что допустимый брак при формировании сперматозоидов — 85%. Все, что превышает 85%, относится к термину «тератозооспермия». Но надо понимать, что это термин условный. Например, отбор сперматозоидов по строгим критериям Крюгера допускает брак до 96%. То есть 96% брака для программы ВРТ — это нормальная спермограмма, которую можно использовать для ЭКО и других вспомогательных репродуктивных технологий, потому что материал для этого специально готовится. Например, при градиентном центрифугировании оттуда удаляются патологические формы, лейкоциты, различные антиспермальные антитела и прочие негативные факторы. Поэтому для ВРТ процент брака может быть увеличен. Что касается попыток для естественного зачатия, то тут количество нормальных сперматозоидов должно быть больше 15% (14–15% считается нижним порогом).
Что касается лечения тератозооспермии — здесь все относительно. Цикл консервативного лечения рассчитан примерно на один год, за который проходит четыре трехмесячных цикла, потому что цикл развития сперматозоида — 72 дня и лечение привязано к этому сроку. Если через три месяца у пациента не наступило улучшение, ему, как правило, меняется терапия. Если после еще трех месяцев особой эффективности лечения нет, то это повод для консультации пациента в клинике вспомогательных репродуктивных технологий. И если даже у пациента есть существенные улучшения по тератозооспермии, но мы его лечим год и у пары не наступает беременность, это тоже дополнительный повод для обследования в клинике ВРТ.
Если в вашей ситуации присутствует и мужской, и женский фактор и количество сперматозоидов достаточно для вспомогательных репродуктивных технологий, то тут справедливы правила обычного сбора биоматериала. Можно добавить антиоксиданты в виде фолиевой кислоты или полинасыщенные жирные кислоты в виде рыбьего жира, омеги-3. Этого вполне хватит для того, чтобы подготовиться к программе ВРТ при высокой степени тератозооспермии.
С цинком ситуация неоднозначная. Все дело в том, что эякулят, или сперма, — это вещество, которое состоит из продуктов жизнедеятельности сразу пяти органов: яички, придатки, предстательная железа, семенные пузырьки и куперовы железы. Цинк иногда служит достаточно серьезным маркером заболеваний некоторых вспомогательных органов, таких как семенные пузырьки, например. Кроме того, цинковый каскад — это один из главных противовоспалительных комплексов защиты предстательной железы. А по составу почти половина эякулята — это секрет предстательной железы. Соответственно, роль цинка весьма значима в противовоспалительном плане. Поэтому если цинк понижен — хорошо добавлять что-нибудь для улучшения качества сперматогенеза именно в противовоспалительном плане, потому что сами по себе лейкоциты дают в несколько раз более сильное свечение и негативный эффект на сперматогенез, чем самые негативные факторы.
А если цинк повышен, то нужно разбираться почему. Потому что это может быть свидетельством некоторых аномалий в развитии репродуктивных органов.
Схемы лечения и корректировок определяются достаточно индивидуально, и комплексные препараты вроде «Бруди» или «Спермактин» я не назначаю довольно давно. Мы даем набор витаминов, микроэлементов, ферментов и прочих веществ. И как таковых любимых препаратов нет. Назначаем, например, рибоксин в качестве метаболического средства, назначаем коэнзим Q10, особенно при тератозооспермии, если встречается патология хвоста в достаточном количестве. Коэнзим нужен сперматозоиду на финальной стадии созревания. И если мы имеем возможность увеличить часть здоровых сперматозоидов хотя бы на 2–3%, это уже будет большой плюс. Тогда у нас будет не 4% тератозооспермии, а уже 5–7%. Это уже большая победа.
Тут есть несколько вариантов. Первый — назначить вещества, которые улучшают реологию, то есть уменьшают вязкость спермоплазмы. Второй — добавить фитоэнергетики: например, L-карнитин очень неплохо работает. Если есть лейкоциты, желательно убирать их, поскольку они тоже напрямую связаны с качеством сперматогенеза и влияют на вязкость и общую токсичность спермоплазмы. Кроме того, омега или фолиевая кислота могут повлиять на качество подвижности. Первая — за счёт своего антиоксидантного действия, вторая — за счёт улучшения ферментативных реакций.
Воспалительные реакции. Если, например, у пациента есть простатит и в спермограмме лейкоциты больше единицы — это повод его подлечить.
Роль гипербарической оксигенации в сочетании с антиоксидантами в лечении идиопатического мужского бесплодия
1 Кафедра урологии ФГБОУ ВО «Cеверо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова» Минздрава России; Россия, 191015 Санкт-Петербург, ул. Кирочная, 41;
2 Санкт-Петербургское ГБУЗ «Городская Александровская больница»; Россия, 193312 Санкт-Петербург, ул. Солидарности, 4
Введение
Частота бесплодных браков в России составляет 15–20 %, из них около 45 % – по причине мужской инфертильности. Актуальность мужского бесплодия не вызывает сомнений, а методы его диагностики и лечения остаются не до конца изученными. Прогрессирующее снижение мужской фертильности оценивают как состояние, которое может быть связано с воздействием эндои экзогенных факторов. Причинами мужского бесплодия помимо упомянутых могут быть инфекции, передающиеся половым путем и вызывающие заболевания репродуктивных органов, а также варикоцеле.
Наиболее затруднительно и малоэффективно лечение секреторного бесплодия, которое обусловлено первичным (гипергонадотропным) гипогонадизмом при поражении яичек и вторичным (гипогонадотропным) гипогонадизмом. Гормонотерапия таких состояний с известными серьезными осложнениями уже достаточно давно имеет альтернативные неспецифические методы лечения. Частая причина мужского бесплодия – воспалительные заболевания дополнительных половых желез, приводящие к патоспермии [1–4]. Лечение инфертильности у мужчин должно быть направлено на медикаментозную коррекцию выявленных причин патозооспермии.
В андрологической практике 40–70 % случаев патоспермии приходится на идиопатическое мужское бесплодие, когда причину качественных и количественных нарушений эякулята установить не удается, так как при физикальном осмотре изменения не выявляются, гормональный статус в норме и т. д. В этом случае применяется эмпирическая терапия, основанная на имеющихся знаниях о сперматогенезе [5–11].
Нарушения сперматогенеза являются следствием существенных изменений гомеостаза в целом, а также нарушения биохимии клетки, клеточных структур и биологических мембран. Патогенетическими немедикаментозными методами, воздействующими на основные звенья патологического процесса, могут быть экстракорпоральные методы гемои иммунокоррекции, гипербарическая оксигенация (ГБО). Проведенные нами ранее исследования [12–14] показали высокую эффективность ГБО у больных с секреторным бесплодием (патент № 2152210 РФ. Способ лечения бесплодия у мужчин. Заявл. 28.10.1996 г., опубл. 10.07.2000 г. Бюл. № 19). У пациентов нормализовался гормональный фон, улучшались показатели спермограммы, репродуктивной и копулятивной функций (улучшение эрекции, оргазма). Незначительное и непостоянное положительное действие ГБО на сперматогенез у больных с бесплодием было связано, очевидно, с тяжелыми морфологическими и функциональными изменениями в яичках. ГБО обладает универсальным воздействием на организм на субклеточном, клеточном и тканевом уровнях. Ранее мы получили данные об активации продукции гонадотропных гормонов и тестостерона у мужчин с бесплодием под влиянием ГБО: о его положительном воздействии на энергетику сперматозоидов и процессы спермофагии, о снижении дегенеративных форм спермиев, усилении биохимического компонента антиоксидантной защиты.
Однако следует учитывать, что лечебное действие метода ГБО реализуется через механизмы гипероксии и, таким образом, мало отличается от токсического. В условиях исходного повреждения трофической и защитной функций гематотестикулярного барьера (морфологически – это оболочка семенных канатиков и цитоплазма сустентоцитов) лечебные эффекты гипероксии уступают повреждающим эффектам, а антиоксидантная защита организма оказывается несостоятельной
В клинической практике имеется большой опыт использования препаратов-антиоксидантов в сочетании с ГБО при печеночной недостаточности и черепномозговых травмах [15, 16]. Резонно также предположить, что по мере утяжеления степени расстройств сперматогенеза необходимо усиление антиоксидантной защиты.
Участие оксидативного стресса в патогенезе мужского бесплодия предопределило изучение эффективности различных антиоксидантов (витаминов, микроэлементов) в лечении данного заболевания [17, 18]. Антиоксиданты защищают организм от свободных радикалов, которые образуются как в результате естественных физиологических процессов, так и при патологических изменениях [19–21].
Последние несколько лет в качестве средств 1-й линии терапии мужской инфертильности часто используются биологически активные добавки (БАД). По регистрационной форме эти препараты не являются лекарствами, но в своем составе часто содержат витамины, аминокислоты и микроэлементы в количестве, достаточном для восстановления качества эякулята. К таким БАДам относятся комбинированный препарат для повышения мужской фертильности Сперотон и антиоксидантный комплекс Синергин (оба –производства компании «АКВИОН», Россия).
Свойства компонентов, входящих в состав Сперотона
L-карнитин – наиболее важный биохимический маркер нормального созревания сперматозоидов, продуцируется придатком яичка [22, 23]. Также установлено, что L-карнитин обладает антиоксидантной активностью за счет удаления токсичного внутриклеточного ацетилкофермента А и стабилизации клеточной мембраны сперматозоидов, чья целостность нарушается под действием активных форм кислорода, гиперпродукция которых является важным патогенетическим фактором патоспермии у мужчин [24, 25]. Физиологическая роль L-карнитина достаточно полно изучена в последние десятилетия. Потребность в нем индивидуальна для каждого человека и зависит от физических и эмоциональных нагрузок. Известно, что эндогенная секреция L-карнитина составляет лишь 25 % от суточной потребности, в то время как 75 % L-карнитина должны поступать с пищей. Он содержится во многих тканях человека, но наибольшей концентрации достигает в эпидидимальном секрете (его присутствие необходимо для созревания сперматозоидов). Недостаточное потребление L-карнитина может являться одной из причин патозооспермии.
Витамин Е (α-токоферол) – наиболее распространенный антиоксидант в природе. Является липофильной молекулой, способной инактивировать свободные радикалы непосредственно в гидрофобном слое мембран и таким образом предотвращать развитие цепи перекисного окисления. Различают 8 типов токоферолов, но тип α наиболее активен. Витамин Е (α-токоферол) ингибирует свободнорадикальное окисление путем отдачи электрона, что приводит к инактивации радикала липида и превращению витамина Е в стабильный, полностью окисленный токоферолхинон.
Цинк – важный микроэлемент, металл, который необходим для нормального функционирования мужской репродуктивной системы, его дефицит приводит к снижению уровня тестостерона и, соответственно, патозооспермии. Цинк преимущественно секретируется в предстательной железе, в большом количестве содержится в созревающих сперматозоидах, поскольку его количество коррелирует с уровнем потребления кислорода и стабильностью ядерного хроматина. Цинк является кофактором большой группы ферментов и поэтому необходим для протекания многих биохимических процессов. Он стимулирует производство γ-интерферона, необходимого для правильного функционирования иммунной системы, снижает уровень свободных радикалов, обеспечивает общую защиту от старения, действуя как антиоксидант [26].
Селен является микроэлементом, способным уменьшать окислительный стресс. Он необходим для созревания сперматозоидов и нормального развития яичек. При дефиците селена процесс сперматогенеза нарушается за счет атрофии сперматогенного эпителия. Патологические изменения сперматозоида, по-видимому, локализуются преимущественно в средней части и головке клетки. Было показано, что прием добавок с селеном способствует увеличению подвижности сперматозоидов и снижению их повреждения свободными радикалами. Ведущий механизм развития последствий селенового дефицита заключается в повреждении клеточных мембран из-за перекисного окисления липидов (ПОЛ), обусловленного снижением активности фермента глутатионпероксидазы, активным центром которого является селен [27, 28].
Витамин B9 (фолиевая кислота) – водорастворимый витамин, хорошо растворяется в воде при щелочных значениях pH, легко разрушается при тепловой обработке и на свету. Витамины группы В составляют самую обширную группу отдельных витаминов. Они выполняют роль кофакторов, участвующих в работе ферментов, способствуют переносу метильных, метиленовых и формильных групп в клетку. Фолиевая кислота незаменима для синтеза ДНК и, следовательно, способствует усилению сперматогенеза и увеличению стабильности сперматозоидов, уменьшая фрагментацию ДНК. При низких уровнях этой кислоты наблюдается снижение количества и подвижности сперматозоидов. Она играет важную роль в сперматогенезе, влияя на объем эякулята и качество спермы. Прием фолиевой кислоты помогает уменьшить количество дефектных сперматозоидов, а следовательно, снижает риск рождения ребенка с генными аномалиями.
Свойства компонентов, входящих в состав Синергина
Убихинон (коэнзим Q10) – это кофермент, который синтезируется в организме человека и является одним из мощнейших антиоксидантов. Его антиокислительная активность фактически в 2 раза превышает активность других антиоксидантов. Главным преимуществом этого соединения является то, что он способен восстанавливаться из окисленной формы в отличие от других жирорастворимых антиоксидантов, например витамина A. Именно восстановленная форма коэнзима Q10 предотвращает разрушение мембран в липопротеинах низкой плотности, липосомах и ДНК. Защищая клетки от пагубного воздействия свободных радикалов, коэнзим Q10 обеспечивает нормальное протекание жизненно важных обменных процессов организма. Убихинон также участвует в выработке энергии в митохондриях и поэтому необходим сперматозоидам, энергетические потребности которых особенно высоки.
Ликопин – пигмент, относится к природным соединениям группы каротиноидов. Ликопин не синтезируется в человеческом организме, он поступает только с пищей. Биологическая активность ликопина связана прежде всего с его антиоксидантными свойствами, т. е. со способностью ингибировать свободнорадикальные процессы в клетках. Особый интерес представляют данные о том, что ликопин может прямо реагировать на перекисные радикалы, участвуя, таким образом, в процессе окисления липидов. Механизм действия этого пигмента заключается в его способности функционировать как антиоксидант, выводящий перекисные радикалы из сферы цепных свободнорадикальных реакций.
Рутин (витамин Р) является мощным природным антиоксидантом. Он защищает капилляры, уменьшает их повышенную проницаемость, укрепляет стенки сосудов, снижает их отечность и воспаление, что способствует улучшению кровоснабжения всего организма. Рутин обладает антиагрегационным действием, способствуя улучшению микроциркуляции во всех органах и тканях. Его прием снижает степень венозной недостаточности. Рутин полезен пациентам с сахарным диабетом и другими заболеваниями, связанными с оксидативным стрессом [29].
Витамин С (аскорбиновая кислота, АК) – это антиоксидант, который участвует в ингибировании ПОЛ, реализуя 2 различных механизма: во-первых, восстанавливает окисленную форму витамина Е и таким образом поддерживает необходимую концентрацию этого антиоксиданта непосредственно в мембранах клеток, и, во-вторых, будучи водорастворимым витамином и сильным восстановителем, взаимодействует с водорастворимыми активными формами кислорода и инактивирует их.
Β-каротин – предшественник витамина А, обладает антиоксидантным действием и ингибирует ПОЛ. Β-каротин, а также каротиноиды, не способные к образованию витамина А, выполняют антиоксидантные функции за счет наличия изопреноидных участков. Они являются достаточно эффективными ловушками для синглетного кислорода (в особенности при низком парциальном давлении последнего). Кроме того, в этом случае они могут действовать иначе, выступая в качестве антиоксидантных соединений, обрывающих цепи ПОЛ. Эти вещества оказывают мощное антиоксидантное действие, стимулируют сперматогенез и увеличивают подвижность сперматозоидов. В то же время механизм их антиоксидантного эффекта недостаточно изучен. Представляется, что одну из ведущих ролей при этом играет нормализация тиол-дисульфидного и аскорбатного обменов в органах репродуктивной системы.
Цель настоящей работы – оптимизация результатов применения ГБО в комбинированном лечении пациентов с идиопатическими нарушениями спермограммы с проявлениями олигоастенотератозооспермии. При этом в задачи исследования входило изучение показателей тиол-дисульфидного и аскорбатного обменов, ПОЛ, супероксиддисмутазы (СОД) в плазме и эякуляте больных с бесплодием и изменений этих показателей при использовании ГБО в сочетании с препаратами Сперотон и Синергин в лечении патоспермии.
Материалы и методы
В исследовании приняли участие 155 мужчин в возрасте от 20 до 45 лет, из которых у 120 мужчин установлено идиопатическое бесплодие, а остальные 35 были практически здоровы.
Критериями включения в группы исследования являлись:
Все пациенты с бесплодием (N = 120) были разделены случайным образом на 3 группы. В 1-ю группу вошли 40 пациентов, которые проходили лечение ГБО и получали препарат Сперотон по 1 саше 1 раз в день. Вторую группу составили 40 пациентов, которые также проходили терапию ГБО, но получали препарат Синергин по 2 капсулы 1 раз в сутки. В 3-ю группу вошли 40 больных, которым было проведено лечение ГБО в сочетании с приемом Сперотона (по 1 саше 1 раз в день) и Синергина (по 2 капсулы 1 раз в день). Пациенты всех 3 групп после окончания курса ГБО продолжали прием препаратов в течение 3 мес. Длительность терапии обусловлена периодом созревания сперматозоидов, равным 74 дням. Четвертую (контрольную) группу составили 35 практически здоровых мужчин.
Курс ГБО состоял из 10 ежедневных сеансов продолжительностью 60 мин. Каждый сеанс проводился при давлении 1,5–2,0 АТА (0,15198–0,20265 МПа). Использовалась одноместная терапевтическая барокамера «ОКА-МТ» («Технодинамика», Россия).
В качестве основного критерия оценки эффективности проводимой терапии использовали спермограмму. Исследование спермы проводили по стандартной методике до начала терапии и через 3 мес от начала приема препаратов, при этом ее основные параметры оценивали в соответствии с требованиями руководства Всемирной организации здравоохранения [30], объем эякулята, концентрацию, подвижность и морфологию сперматозоидов – по строгим критериям Крюгера.
У всех больных в каждой из 4 групп до лечения, через 1 и 3 мес исследовали в плазме крови и эякуляте изменения уровней:
Вычисляли коэффициенты SH/SS и АК/ОФАК. Все перечисленные показатели определяли методом индуцированной хемилюминесценции с помощью биохемилюминометра БХЛ-06 (НИЦ «Биоавтоматика», Россия) [31]. Оценку достоверности разницы между средними значенияи проводили по критерию Стьюдента. Различия считались малодостоверными при р